Uppsala Kulturmaraton kommer att gå genom natursköna områden och historiska miljöer, längs ”Gula stigen”, Fyrisåns stränder, genom centrala Uppsala och ut mot vikingarnas heliga plats, högarna i gamla Uppsala för att ha sin målgång i centrala Uppsala. Större delen av loppet går längs stigar och grusvägar, men även kortare sträckor på asfalt.